Mục đích sử dụng

Xét nghiệm kết hợp Dengue NS1 Ag-IgG/IgM là xét nghiệm miễn dịch sắc ký nhanh để phát hiện định tính các kháng thể (IgG và IgM) và kháng nguyên NS1 của virus sốt xuất huyết đối với virus sốt xuất huyết trong Huyết thanh hoặc Huyết tương để hỗ trợ chẩn đoán nhiễm virus sốt xuất huyết.

[BẢN TÓM TẮT]

Sốt xuất huyết là một bệnh truyền nhiễm cấp tính do véc tơ truyền bệnh do virus sốt xuất huyết lây truyền qua muỗi.Nhiễm virus Dengue có thể gây nhiễm trùng lặn, sốt xuất huyết Dengue, sốt xuất huyết Dengue, sốt xuất huyết Dengue.Các biểu hiện lâm sàng điển hình của sốt xuất huyết bao gồm khởi phát đột ngột, sốt cao, nhức đầu, đau cơ, xương và khớp dữ dội, phát ban trên da, có xu hướng chảy máu, sưng hạch, giảm bạch cầu, giảm tiểu cầu, v.v. ở một số bệnh nhân.Bệnh này về cơ bản phổ biến ở các vùng nhiệt đới và cận nhiệt đới, vì bệnh này lây truyền qua muỗi Aides, lý do phổ biến có tính chất mùa vụ nhất định, thường xảy ra hàng năm vào tháng 5 ~ tháng 11, cao điểm là vào tháng 7 ~ tháng 9.Tại vùng dịch mới, dân cư nhìn chung dễ mắc bệnh nhưng tỷ lệ mắc bệnh chủ yếu là người lớn, trong vùng lưu hành tỷ lệ mắc chủ yếu là trẻ em.

Nguyên tắc

Xét nghiệm kết hợp Dengue NS1 Ag-IgG/IgM là xét nghiệm miễn dịch định tính dựa trên dải màng để phát hiện kháng thể virus sốt xuất huyết (IgG và IgM) và kháng nguyên NS1 của virus sốt xuất huyết trong Huyết thanh hoặc Huyết tương.

Đối với xét nghiệm IgG/IgM: Thiết bị xét nghiệm bao gồm: 1) miếng liên hợp màu đỏ tía chứa kháng nguyên vỏ tái tổ hợp sốt xuất huyết kết hợp với vàng keo (liên hợp sốt xuất huyết), 2) dải màng nitrocellulose chứa hai vạch xét nghiệm (vạch T1 và T2) và một dòng điều khiển (dòng C).Vạch T1 phủ trước kháng thể phát hiện kháng thể IgM kháng sốt xuất huyết, vạch T2 phủ kháng thể phát hiện kháng thể IgG kháng sốt xuất huyết.Khi một lượng mẫu thử vừa đủ được phân phối vào giếng mẫu của băng thử, mẫu sẽ di chuyển nhờ tác động mao dẫn trên băng.Kháng thể kháng sốt xuất huyết IgG, nếu có trong mẫu xét nghiệm, sẽ liên kết với các liên hợp sốt xuất huyết.Sau đó, phức hợp miễn dịch được thu giữ bởi thuốc thử được phủ sẵn trên dải T2, tạo thành vạch T2 màu đỏ tía, cho biết kết quả xét nghiệm IgG dương tính với sốt xuất huyết và gợi ý nhiễm trùng gần đây hoặc tái phát.IgM kháng sốt xuất huyết nếu có trong mẫu bệnh phẩm sẽ liên kết với các liên hợp sốt xuất huyết.Sau đó, phức hợp miễn dịch được thu giữ bởi thuốc thử phủ trên vạch T1, tạo thành vạch T1 màu đỏ tía, cho thấy kết quả xét nghiệm IgM sốt xuất huyết dương tính và gợi ý nhiễm trùng mới.Sự vắng mặt của bất kỳ dòng T nào (T1 và T2) cho thấy kết quả âm tính.

Đối với xét nghiệm NS1: Trong quy trình xét nghiệm này, kháng thể kháng sốt xuất huyết NS1 được cố định trong vùng dòng xét nghiệm của băng cassette.Sau khi đặt mẫu máu toàn phần/huyết thanh/huyết tương vào giếng mẫu, nó sẽ phản ứng với các hạt được phủ kháng thể kháng sốt xuất huyết NS1 đã được áp dụng vào miếng đệm mẫu.Hỗn hợp này di chuyển sắc ký dọc theo chiều dài của que thử và tương tác với kháng thể kháng sốt xuất huyết NS1 cố định.Nếu mẫu chứa kháng nguyên NS1 của virus sốt xuất huyết, một vạch màu sẽ xuất hiện ở vùng vạch xét nghiệm cho biết kết quả dương tính.Nếu mẫu bệnh phẩm không chứa kháng nguyên NS1 của virus sốt xuất huyết, vạch màu sẽ không xuất hiện ở vùng này cho biết kết quả âm tính.

Để phục vụ như một biện pháp kiểm soát theo quy trình, một vạch màu sẽ luôn xuất hiện ở vùng vạch điều khiển cho biết khối lượng mẫu thích hợp đã được thêm vào và hiện tượng thấm màng đã xảy ra.

Lưu trữ và ổn định

Bảo quản dưới dạng đóng gói trong túi kín ở nhiệt độ phòng hoặc để trong tủ lạnh (4-30oC hoặc 40-86℉).Thiết bị kiểm tra ổn định cho đến ngày hết hạn được in trên túi kín.

Que thử phải được đựng trong túi kín cho đến khi sử dụng.

Thu thập và chuẩn bị mẫu

1. Xét nghiệm kết hợp Dengue NS1 Ag-IgG/IgM có thể được thực hiện trên Huyết thanh hoặc Huyết tương.

2. Thu thập mẫu máu toàn phần, huyết thanh, huyết tương theo quy trình xét nghiệm lâm sàng thông thường.

3. Việc xét nghiệm phải được thực hiện ngay sau khi lấy mẫu.Không để mẫu ở nhiệt độ phòng trong thời gian dài.Để bảo quản lâu dài, mẫu vật phải được giữ ở nhiệt độ dưới -20oC.

4. Đưa mẫu về nhiệt độ phòng trước khi xét nghiệm.Mẫu đông lạnh phải được rã đông hoàn toàn và trộn đều trước khi thử nghiệm.Mẫu vật không nên được đông lạnh và rã đông nhiều lần.

Quy trình kiểm tra

Cho phép thử nghiệm, mẫu thử, dung dịch đệm và/hoặc chất điều khiển đạt đến nhiệt độ phòng 15-30oC (59-86℉) trước khi thử nghiệm.

1. Mang túi về nhiệt độ phòng trước khi mở.Lấy thiết bị kiểm tra ra khỏi túi kín và sử dụng càng sớm càng tốt.Đặt thiết bị kiểm tra trên bề mặt sạch sẽ và bằng phẳng.

2. Đối với Xét nghiệm IgG/IgM: Giữ ống nhỏ giọt theo chiều dọc và chuyển 1 giọt mẫu thử (khoảng 10μl) vào giếng mẫu (S) của thiết bị xét nghiệm, sau đó thêm 2 giọt dung dịch đệm (khoảng 70μl) và bắt đầu hẹn giờ.Xem hình minh họa bên dưới.

3. Đối với Xét nghiệm NS1: Giữ ống nhỏ giọt theo chiều dọc và truyền 8 ~ 10 giọt huyết thanh hoặc huyết tương (khoảng 100μl) vào (S) giếng mẫu của thiết bị xét nghiệm, sau đó khởi động bộ hẹn giờ.Xem hình minh họa bên dưới.

4. Đợi (các) vạch màu xuất hiện.Đọc kết quả sau 15 phút.Không giải thích kết quả sau 20 phút.

Giải thích kết quả

Tích cực:

Đối với xét nghiệm IgG/IgM: Vạch chứng và ít nhất một vạch xét nghiệm xuất hiện trên màng.Sự xuất hiện của vạch xét nghiệm T2 cho thấy sự hiện diện của kháng thể IgG đặc hiệu sốt xuất huyết.Sự xuất hiện của vạch xét nghiệm T1 cho thấy sự hiện diện của kháng thể IgM đặc hiệu sốt xuất huyết.Và nếu cả hai vạch T1 và T2 đều xuất hiện, điều đó cho thấy sự hiện diện của cả kháng thể IgG và IgM đặc hiệu sốt xuất huyết.Nồng độ kháng thể càng thấp thì vạch kết quả càng yếu.

Đối với Kiểm tra NS1: Xuất hiện hai dòng.Một vạch phải luôn xuất hiện trong vùng vạch điều khiển (C) và một vạch có màu rõ ràng khác sẽ xuất hiện trong vùng vạch thử nghiệm.

Tiêu cực:

Một vạch màu xuất hiện trong vùng điều khiển (C). Không có vạch màu rõ ràng nào xuất hiện trong vùng vạch thử nghiệm.

Không hợp lệ: Dòng điều khiển không xuất hiện.Khối lượng mẫu không đủ hoặc kỹ thuật quy trình không chính xác là những lý do rất có thể dẫn đến lỗi dây chuyền điều khiển.Xem lại quy trình và lặp lại thử nghiệm với thiết bị thử nghiệm mới.Nếu sự cố vẫn tiếp diễn, hãy ngừng sử dụng bộ thử nghiệm ngay lập tức và liên hệ với nhà phân phối địa phương của bạn.